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                上海仁捷生物發(fā)布-豬(NGAL2)elisa檢測原理

                更新時(shí)間:2017-06-29      瀏覽次數(shù):1565

                豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2NGAL2試劑盒(ELISA)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2NGAL2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2NGAL2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

                試劑盒組成:

                 

                名稱

                96孔配置

                48孔配置

                備注

                微孔酶標(biāo)板

                8孔×12

                8孔×6

                標(biāo)準(zhǔn)品

                0.3mL*6管

                0.3mL*6管

                樣本稀釋液

                6mL

                3mL

                檢測抗體-HRP

                10mL

                5mL

                20×洗滌緩沖液

                25mL

                15mL

                按說明書進(jìn)行稀釋

                底物A

                6mL

                3mL

                底物B

                6mL

                3mL

                終止液

                6mL

                3mL

                封板膜

                2張

                2張

                說明書

                1份

                1份

                自封袋

                1個(gè)

                1個(gè)

                1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:240、120、60、30、15、7.5 pg/mL

                2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

                 

                實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

                所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品濃度。(例如下圖)

                 

                試劑盒性能

                •  檢測范圍7.5 pg/mL  240 pg/mL
                •  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL
                •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
                •  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 
                •  

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