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                (AGT)ELISA檢測,犬血管緊張素原ELISA試劑盒操作步驟

                更新時間:2018-08-03      瀏覽次數(shù):2645

                犬血管緊張素原(AGT)ELISA試劑盒

                英文名稱:Canine AGT ELISA Kit
                實驗類型:夾心法
                檢測范圍:12.5 pg/mL – 400 pg/mL
                低檢測限:1.0 pg/mL
                應用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關液體(本產品僅供實驗室科研及非臨床用途)

                操作步驟

                1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

                2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

                3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

                4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

                5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

                6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

                7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

                注意事項

                1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

                2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

                3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

                4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

                5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

                6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

                7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

                8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

                9. 不能使用過期產品。

                10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

                 

                洗板方法

                手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。

                自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

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